素衣倾颜淡若尘
我用0.8%琼脂糖凝胶电泳,脂蛋白与苏丹黑比例10:1跑不出条带,然后1:1混匀37℃,30min后上样时样品飘在上样孔中间,也没跑出条带,有大佬做过吗?求分享经验。
loveliufudan
OX-LDL和LDL的电泳迁移率可能存在一定差异,因为OX-LDL经氧化后,脂质双层发生了结构改变,导致其电荷密度和分子大小发生变化,从而影响了其电泳迁移率。因此,建议您尝试调整电泳条件,优化实验流程,以更好地分离和检测LDL和OX-LDL。
以下是一些可能有帮助的建议:
优化琼脂糖凝胶浓度:您可以尝试增加琼脂糖凝胶的浓度,以提高分离效果和条带清晰度。一般情况下,0.8%的琼脂糖凝胶电泳可以分离LDL和OX-LDL,但是如果仍然无法得到良好的条带,可以考虑增加琼脂糖凝胶的浓度,例如尝试使用1%的琼脂糖凝胶。
调整样品加载量:您可以尝试增加样品加载量,以提高检测灵敏度。但是,过多的样品可能会导致条带变宽或者失真,因此需要控制好加载量。
调整脂蛋白和苏丹黑的比例:您可以尝试调整脂蛋白和苏丹黑的比例,以提高分离效果和条带清晰度。一般情况下,使用10:1的脂蛋白和苏丹黑比例可以得到良好的条带。但是,您可以尝试调整比例,例如尝试使用5:1或3:1的比例,以优化实验效果。
控制样品的pH值:OX-LDL的电泳迁移率可能受样品的pH值影响,因此需要控制好样品的pH值。建议使用pH为7.4左右的缓冲液进行电泳,避免样品的pH值过高或者过低导致结果不准确。
尝试其他电泳方法:如果以上方法都无法得到良好的结果,可以尝试使用其他电泳方法,例如聚丙烯酰胺凝胶电泳或者聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳等方法,以分离和检测LDL和OX-LDL。
土井挞克树
可以把脂蛋白的含量降低一下,可以参考8:1的比例再试一下
相关产品推荐
相关问答