使用WB检测TERT蛋白，为什么分子量低于预期，为什么出现杂带！

分子量比预期低可能是由以下几个原因引起的：细胞提取和蛋白质浓度问题：如果提取细胞的质量和/或数量不足，或者蛋白质提取过程中出现问题，会导致蛋白质的含量不足。这可能会导致目的蛋白的表达水平低于预期。抗体问题：WB实验使用抗体来检测目的蛋白。如果使用的抗体出现问题，例如批次差异或失效，也可能导致目的蛋白的表达水平低于预期。转录后修饰问题：转录后修饰是指在蛋白翻译完成后对蛋白进行修饰，例如磷酸化、乙酰化等。如果目的蛋白在WB实验前被修饰，则可能导致抗体无法识别其表达水平。实验操作问题：WB实验是一项复杂的实验，需要准确的实验操作。如果实验操作不正确或不准确，例如不完全转移蛋白质、过度暴露、浓度不准确等，也可能导致目的蛋白的表达水平低于预期。

说明蛋白存在部分降解，降解的短片段形成了杂带。

如果很多杂带而且都不在预期位置上，很可能那些都不是目的条带，可能是蛋白表达量低，目的条带出不来，或者是抗体浓度太高，杂带太多。

以下是一些可能的解释：

翻译后修饰：TERT蛋白在翻译后可能会发生多种修饰，如糖基化、磷酸化、乙酰化等，这些修饰可能会影响TERT蛋白的迁移速度和分子量。如果TERT蛋白未被完全修饰或受到不同类型的修饰，可能会出现低于预期分子量的现象。

蛋白质裂解不完全：如果样品中的蛋白质没有被完全裂解，可能会出现高分子量的杂带。建议在裂解过程中加入足够的裂解缓冲液和酶，或者增加裂解时间，确保样品中的蛋白质被完全裂解。

不同蛋白质的交叉反应：如果样品中存在与TERT蛋白具有相似分子量的其他蛋白质，则可能会出现杂带。建议使用TERT蛋白特异性的抗体，并对样品进行多次检测和验证，以确定杂带是否由其他蛋白质引起。

电泳条件不当：电泳条件不当也可能导致TERT蛋白迁移异常或出现杂带。例如，电泳时间、电场强度、缓冲液的配制等都可能影响电泳的效果。建议对电泳条件进行优化和调整，确保电泳条件的稳定性和一致性。