WB显成这样是什么原因呢？ 回收的一抗能用多久？保存在四度还是-20度

首先看看有没有marker，初步判断转膜等步骤有没有问题，其次没有条带可能是由于目的蛋白表达低或者抗体不够了，最后一抗用个3-5次就差不多了，如果近期都会使用就放4°，不怎么用就放-20

原因是样品溶解不好。一抗体回收后有的保存时间较短，可能1周内或1-2周，有的则能保存较长时间。保存得当的话，一抗工作液可重复利用2-3次一般不影响效果，但也不绝对，主要是看你的抗体本身如何，如果第一次做出来效果就不理想就不提倡这么做了。一般保存在4℃。

回收的一抗保存在4°二个月左右。

好的抗体回收可以用7，8次，抗体原液在哪保存就哪保存。

显影成这样，可能是由于蛋白在电泳过程中没有完全迁移或不均匀迁移所致。另外，可能是电泳时间、电场强度或电泳缓冲液配制的问题导致的。建议优化电泳实验条件，确保样品充分迁移。

关于回收的一抗的保存时间和温度，不同的抗体具有不同的稳定性和保存要求，建议查看抗体生产商的说明书或推荐的存储条件。通常来说，大多数一抗可以在4℃下保存2-3个月，长期保存建议存储在-20℃或更低温度下。但需要注意的是，冷冻和解冻可能会影响抗体的活性，建议分装成适量的小份并避免频繁冻融，以便保证抗体的最佳活性和稳定性。

背景太模糊，考虑非特异性结合，封闭的太差了