跑WB时，曝片出现以下情况

首先确定膜上是否有marker，有的话那可能是上样量不够或者抗体种属不对

可能有以下原因：

蛋白质没有转移成功：可能是由于蛋白质在转移过程中未能充分转移到膜上，导致检测不到目的蛋白的条带。

非特异性结合：可能是由于膜上存在非特异性的蛋白结合，导致蛋白质无法结合到膜上。

染色过程中的问题：可能是由于染色过程中的缺陷导致无法正确检测目的蛋白。

针对这些问题，可以考虑以下解决方案：

确保蛋白质转移成功：可以尝试调整蛋白质转移的时间和电压，以保证蛋白质在转移过程中充分转移到膜上。另外，可以使用Ponceau染色检测蛋白质转移效果，以确定是否转移成功。

减少非特异性结合：可以尝试优化抗体的浓度和选择更加特异性的抗体，以减少非特异性结合。

检查染色过程：可以检查染色过程中是否存在缺陷，例如染色时间、抗体浓度等等。此外，可以尝试调整染色条件和更换其他的染色方法。

另外，封闭液使用BSA封闭液一般是没有问题的，但是有时候BSA封闭液中的BSA可能存在污染，也可能会导致问题。因此，建议使用新鲜的BSA封闭液，并且在使用过程中注意对液体的保存和使用方式。

没有出来条带原因很多，如果同时做的其它蛋白都出来了只是这个蛋白没出来，那应该就是抗体孵育的问题，抗体浓度太低？二抗不行？有些抗体对ph要求比较高，抗体稀释液以及洗膜的buffer PH太高也会影响抗体的结合。