wb条带目的蛋白下面一片黑

可能是封闭时间比较短，洗膜没洗干净，一抗浓度适当降低，等等

曝光时间再缩短一些，增加洗膜buffer中土温20的量

黑色条带通常是由于过多的蛋白负荷或者过高的一抗浓度引起的。建议你尝试以下几个步骤来解决这个问题：

降低一抗浓度：如果一抗浓度太高，会导致蛋白负荷过多，从而使得下方的内参带变得模糊或黑色。尝试降低一抗浓度，比如从1:50000调整到1:100000，然后再进行免疫印迹实验。

调整二抗浓度：如果一抗浓度已经很低了，那么尝试调整二抗浓度，比如从1:10000调整到1:5000。

调整蛋白负荷量：尝试加载更少的蛋白负荷量。如果你已经在减少一抗浓度和二抗浓度后仍然看到黑色条带，那么可能是因为你加载的蛋白负荷太多了，导致下面的内参带变得模糊或黑色。

检查免疫印迹仪器：如果以上措施都没有解决问题，那么检查一下你使用的免疫印迹仪器是否正常。比如检查电流是否稳定，是否有漏电等情况。

一抗浓度太高或孵育时间太长，降低浓度和孵育时间