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southern blot应该如何定量?

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balalaLy

southern blot 的结果应该怎么定量呢?它不像wb那样有内参作为参照。

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2 个回答

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huarenqiang5

有帮助

用含溴化乙锭的1%琼脂凝胶电泳法测定,根据加入标准品片断的电泳迁移距离计算样品片断分子量大小。

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loveliufudan

有帮助

为了定量Southern blot的结果,通常需要进行一些额外的步骤和分析。以下是一些可能用于定量Southern blot结果的方法:

标准曲线法:制备一系列已知浓度的DNA标准,并在Southern blot中使用它们来构建一个标准曲线。这将允许您根据样品中的带强度和标准曲线中的标准浓度计算出样品中特定DNA序列的浓度。

比较法:在同一Southern blot膜上使用相同的DNA样品,将其转移至多个位置,以便对同一样品进行多次探测。这可以让您比较相同DNA样品的带强度,从而对不同样品之间的结果进行定量比较。

内参法:虽然Southern blot没有内部标准,但您可以选择使用已知数量的较小DNA序列(例如,18S或28S rRNA)作为内部标准来进行定量。

需要注意的是,这些方法仅提供一种定量Southern blot结果的可能方法。选择合适的方法将取决于您的具体实验和研究问题。

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