请问各位大神nrf2 蛋白wb怎么跑？

我是用12%的胶跑的，转膜、封闭、孵二抗都是两个小时，然后洗的时候不要洗那么多次，三次，每次5min就够了，不然会洗掉。nrf2本身蛋白量67，但是做WB通常是检测100KD的条带（此时nrf2可能有和其他蛋白结合），而且同一泳道nrf2通常会分裂好几条条带。

同样条件下，别的能出来，这个没有出来的话，要考虑一下是抗体的问题了

无条带可能原因：样品未经合适处理；降解或提取不充分；抗体不工作。

nrf2的分子量约57.5kDa。

建议更换一抗，抗体的特异度对这个实验影响很大。更换一个特异度高的一抗

Nrf2是一种转录因子，其分子量为大约110 kDa。在Western blot实验中，Nrf2通常表现为一个分子量约为110 kDa的单一条带。

根据你所提供的实验步骤，你可以考虑一些可能影响Western blot结果的因素：

蛋白质电泳条件：如果电泳条件不够优化，可能会导致蛋白质迁移不全或迁移位置偏移，从而导致检测不到Nrf2的条带。你可以尝试优化电泳条件，如延长电泳时间或增加电泳电压。

蛋白质转移条件：如果转移条件不够优化，可能会导致Nrf2转移到膜上不完全或不均匀，从而导致检测不到Nrf2的条带。你可以尝试优化转移条件，如延长转移时间、增加转移电流或更换膜。

抗体特异性：如果使用的抗体不够特异性，可能会导致与Nrf2非特异性结合的蛋白质也能被检测到，从而干扰了Nrf2的检测。你可以尝试使用其他来源的抗体，如商业抗体或经过验证的其他抗体。

希望以上建议能够帮助你解决问题。