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丙酮固定细胞会掉怎么办

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愁毕业的崇

96孔板细胞转染后用80%丙酮固定,细胞一洗就掉,这是为什么呀

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4 个回答

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loveliufudan

有帮助

使用丙酮固定细胞时,需要注意固定时间和温度。固定时间太短或温度太低,可能会导致细胞未被充分固定而易于脱落。此外,使用PBS或者其他缓冲液洗涤细胞时,也需要轻轻摇晃孔板,避免过于强烈的震动导致细胞脱落。

除了固定时间和温度,另外一些可能导致细胞易于脱落的因素包括:

细胞密度过低或过高,都可能导致细胞易于脱落。

转染试剂或细胞培养液的质量问题,可能会导致细胞易于脱落。

细胞黏附能力较差或对特定基质无法黏附,也可能导致细胞易于脱落。

综上所述,建议您在进行丙酮固定前,先检查固定时间和温度是否充分,并使用适当的缓冲液洗涤细胞。同时,可以适当调整细胞密度、优化转染试剂和培养基质等因素,以提高细胞的黏附能力和稳定性,从而减少细胞脱落的可能性。

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sswei

有帮助

第一,应该用挂胶载玻片,在实验中使用的挂明胶的载玻片,效果很好,基本不掉片。

第二,每切一张片子后应及时地升温溶化一下标本。

第三,最重要的一点,在取材后脱水时间不足,主要是要将组织中的丙酮造成的组织收缩较为明显,充足的脱水时间不仅是水份脱出,而且脱出丙酮,使组织较为稳定。

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土井挞克树

有帮助

增加固定时间,现在说明没有固定成功。

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秋秋欣欣

有帮助

可能你固定的时间不够,或者试剂挥发了效果不太好

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