材料与仪器
盐酸 丙酮 甲醇
步骤
材料
盐酸(高纯;如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)
丙酮(高纯;如 Aldrich 的金标级)
甲醇(高纯;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)
操作程序
本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecular Biology —书改进而成的
1) 配制酸化丙酮:
丙酮 120 ml
HCl 10ul
混合,制成1mmol/L 溶液。
2) 配制沉淀剂:将等体积的酸化丙酮和甲醇混合在一起。置-20℃ 冰箱冷冻。
3) 真空离心,将蛋白质溶液浓缩至少于 0.1 ml。
4) 加入过 5 倍量(按体积)的沉淀剂于蛋白质水溶液。彻底混匀,在-20℃ 冰箱中孵育过夜。
5)4°C 下,用微型离心机的以最高转速离心 30 min。
6) 用精细的巴斯德吸管小心移去上清。沉淀物置通风橱中,用氮气吹 1h,至干。
盐酸(高纯;如 J,T-Baker 的 Ultrex 级)
丙酮(高纯;如 Aldrich 的金标级)
甲醇(高纯;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售级)
操作程序
本操作程序是根据 Current Protocolsin Molecular Biology —书改进而成的
1) 配制酸化丙酮:
丙酮 120 ml
HCl 10ul
混合,制成1mmol/L 溶液。
2) 配制沉淀剂:将等体积的酸化丙酮和甲醇混合在一起。置-20℃ 冰箱冷冻。
3) 真空离心,将蛋白质溶液浓缩至少于 0.1 ml。
4) 加入过 5 倍量(按体积)的沉淀剂于蛋白质水溶液。彻底混匀,在-20℃ 冰箱中孵育过夜。
5)4°C 下,用微型离心机的以最高转速离心 30 min。
6) 用精细的巴斯德吸管小心移去上清。沉淀物置通风橱中,用氮气吹 1h,至干。
来源:丁香实验