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请问一下,问什么蛋白表达中,集菌破碎之后,液体是黄色的,而且过完分子筛之后,跑胶之后,条带还是很杂?

相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

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dxy_nmsqd29


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5 个回答

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土井挞克树

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一般细菌多数会呈现你说的特征,尤其是需氧菌

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申东熙老伯

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没破碎完全的话,液体都会是黄色的,跑胶蛋白杂也很正常,分子筛应该只是筛掉一部分蛋白。

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bamboopiggy

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你如果过滤不好,或者是蛋白表达量不够高,都会出现以上情况,建议你写明你用什么载体,遇到的这个问题

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huarenqiang5

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一般常见于大肠杆菌和海拉细胞。

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loveliufudan

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蛋白质表达过程中,液体颜色的黄色可能是因为存在大量的细胞裂解产物或者富含色素的蛋白质。条带杂乱的问题可能是由于目标蛋白质表达量较低,或者存在其它杂质蛋白质或者表达产物。

为了解决这些问题,您可以考虑以下几点:

优化菌落培养条件以提高目标蛋白质表达量。

在破碎细胞时使用更加彻底的方法,如超声波或高压均质等方法,以确保细胞完全破裂释放蛋白质。

使用更加纯净的蛋白质分离方法,例如磷酸盐缓冲液(PBS)或甘氨酸盐缓冲液(Tris-HCl),以尽可能减少可能的杂质。

在分离蛋白质时,使用更加选择性的方法,例如亲和层析或离子交换层析,以去除杂质。

确保在每个步骤中严格遵循实验条件,以避免对蛋白质产生损伤或丢失。

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