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一个真核基因在原核细胞里面已经成功表达,但是结果呈现出来是包涵体,虽然说包涵体也能纯化吧,但是很麻烦,而且容易在过程中失活
我还能尝试什么呢
dxy_kdzvaizq
1. 降低诱导温度
2. 降低诱导剂浓度
sswei
从以下几方面考虑:信号肽,密码子优化,选择合适的表过载体,选择合适的表达菌株,优化表达条件。
简简单单的8872
诱导的过程中,尝试降低诱导温度,看是否会有可溶蛋白出现;或者在目的蛋白后引入助溶蛋白等
土井挞克树
可以考虑研究蛋白表达前体rna,这是个不错的方向
loveliufudan
可以尝试以下几种方法来解决问题:
调整表达基因的条件:可以尝试调整表达条件,例如培养基的配方、表达基因的温度、pH值等,以最大程度地减少包涵体的生成。
改变表达载体:在某些情况下,选择不同的表达载体可以显著减少包涵体的生成。
改变表达蛋白的终止子:有些表达载体可能带有不适宜的终止子,改变终止子可以减少包涵体的生成。
进行纯化的优化:纯化过程中,可以尝试调整纯化条件,例如温度、pH值等,以最大程度地纯化表达蛋白。
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