victory40K7
乳酸菌发酵液经过乙酸乙酯萃取,离子交换层析,RP-HPLC后进行MALDI-TOF质谱检测,检测结果显示聚合物过多,无法确定目的蛋白分子量,有没有大佬知道怎样去除聚合物
loveliufudan
如果质谱检测结果显示聚合物过多,无法确定目的蛋白的分子量,可以尝试以下方法去除聚合物:
1.增加蛋白质水解步骤。在发酵液中增加蛋白质水解步骤可以切断蛋白质的聚合物,使得质谱检测更加准确。
2.使用蛋白质纯化技术。可以使用蛋白质纯化技术,如柱色谱、电苯胺凝胶等,去除蛋白质中的聚合物。
3.使用蛋白质剪接酶。可以使用蛋白质剪接酶,如热心菌肽酶、信使RNA酶等,去除蛋白质中的聚合物。
4.使用离子交换层析。离子交换层析可以根据电荷来分离蛋白质,可以用来去除蛋白质中的聚合物。
5.使用抗体。可以使用抗体来结合蛋白质聚合物,从而去除聚合物。
6.使用溶剂交换法。溶剂交换法可以将蛋白质从一种溶剂中转移到另一种溶剂中,可以去除蛋白质中的聚合物。
需要注意的是,上述方法并不是万能的,需要根据具体情况来决定使用哪种。
土井挞克树
聚合物一般可以用裂解酶把聚合物的氢键断掉。
简简单单的8872
排阻色谱可以尝试一下,在适当的时间点只收集你的目的蛋白
相关产品推荐
相关问答