大肠杆菌外源蛋白表达。

确实是要先测序的，一般来说实验室做好之后都会先送给公司帮忙测序，得到序列之后自己先分析一遍，是否与设计组有偏差，正反双链是否有问题，引物启动子序列表达是否有问题，确定了这些之后才会进行下一步。

可以尝试更换引物，有的时候引物不正确基因也不表达。

序列插入后是否测序？测序正确才可用于表达。若测序无误，可尝试降低IPTG 浓度

先确定你的质粒构建没有问题，尤其是在质粒的插入位点。