蛋白纯化

大家好，我用pET32a载体的EcoRI和XhoI酶切位点插入我的目的片段1326bp，没有加终止密码子，所以两端都带有His标签，计算融合蛋白大小为67.6KDa，测序正确后转入BL21菌株中，诱导表达30℃，6小时，IPTG浓度0.3，诱导显示包涵体居多，就以包涵体纯化，设计了20.20.50.100.150.200.250.300.500不同咪唑洗脱浓度，跑SDS-PAGE后，出现两条带，红色框的是目的蛋白，下面的那条是什么啊？蛋白降解了吗？我准备做个WB，想先问下这是为什么啊？谢谢！