求问Sf9细胞表达

我们是用pFastbac dual载体共表达两个蛋白（一个250kD，一个30kD)，将质粒转座到DH10Bac感受态后提bacmid在12孔板内转染Sf9扩增P0代毒，我们上次同时做了6个bacmid，其中三个带有荧光蛋白标签，转染后可以看到明显的荧光（至少70%荧光），收P0后将细胞裂解做WB发现只有两个表达了目的蛋白，但是其他几个是别人文献里验证过能够表达的克隆，我的序列跟文献里的一摸一样，在P0代就不能检测到目的蛋白，在后面的P1和P2中更是检测不到。而且最奇怪的是，WB阳性的两个毒在P1和P2以及最后的表达当中都没有验证到有蛋白表达。我有以下疑问，希望做Sf9的朋友能够帮忙解答：

1. 是否存在这种扩增过程中毒株丧失表达目的蛋白的能力，而作为指示的荧光蛋白依然能表达？
2. 在转染初期最需要注意的问题是什么？我用PCR和测序的方法验证过我的bacmid是没有问题的，而且我的荧光蛋白也能正常表达，为什么别人成功表达的蛋白到我手上无法重复出来了？除了bacmid的原因还有其他的嘛？