16KD小分子蛋白的WB实验，一直未跑出来，求大神们指点指点。
dxy_voblrrwe
蛋白是用200定量，每孔加样量6到7ul.我配的是15％的胶，1.5mm，10孔。电泳条件是85V,120V.转膜使用的0.45PVDF，转膜条件是300mA,30min.转膜液是加入SDS的，不知转膜液是否要加sds,我其他的实验条件是否也有错误，求大神们指点指点。每次都是分子跑不出来，内参可以
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3 个回答
土井挞克树
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胶配的不好，校正一下胶的比例后再来
NatureBios
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这个可以用0.22um的膜试一下，16kd不用加sds，最好能根据说明书加一个阳参，
balalaLy
有帮助
出了Western转膜液中加SDS，其它都没有大问题，此外，上样只6-7ul是不是太少了？如果这个蛋白本身表达就不高，上样量太少肯定就跑不出来
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