两个月后做wb，细胞裂解测浓度加上样缓冲液煮沸保存还是裂解液直接-80℃保存？

dxy_a2dggj4w

2022-09-23

细胞房预约时间要到了，下个月就不能做啦，但是11月才有时间测wb，这个月制的细胞该怎么保存才好？保存期间蛋白会不会再被酶解，这样加上样缓冲液煮，用的时候就不能再测蛋白浓度了，按这个月的数据上样可能会不准。我更偏向直接保存裂解液，做的时候再测蛋白浓度

锦鲤正在进行时

2022-09-24

有帮助

煮沸之后吧，裂解液的话一周还可以，时间久了蛋白会降解的，wb显影的时候就信号弱或没信号了

bamboopiggy

2022-09-23

有帮助

建议你将细胞裂解液测完浓度以后分装，一部分直接加上样的buffer ，煮了保存，一部分，直接-80冻存。

毛利小五郎的徒弟

2022-09-23

有帮助

推荐直接保存，煮沸后，物质理化性质不稳定，容易影响。

dxy_a2dggj4w

2022-10-01

直接保存是指把细胞刮下来,pbs洗了后，离心，-80保存沉淀嘛？

balalaLy

2022-09-23

有帮助

当然是煮沸变性之后保存，只裂解后那些蛋白酶抑制剂会失效，蛋白会降解。