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求助WB出现污渍

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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砺剑是海

请问各位大神,WB结果出现如图的不规则斑块有可能有哪些原因呢?另祝医师节快乐!

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3 个回答

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whilt-shirt

有帮助

有可能是膜污染了,转膜时注意带好手套

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你好几和户

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原因分析 膜上其他部位与一抗或二抗非特异性结合,配置的封闭液可能没有完全溶解,使不容颗粒附着在膜上从而导致发光时候膜上形成黑点。 抗体与封闭试剂反应。 HRP偶联二抗中有聚集体。 解决方法: 配置封闭液后最好静止一下,封闭牛奶一定要纯,封闭结束之前要清洗三遍之后再加一抗。 使用前过滤封闭试剂。 过滤二抗试剂,去除聚集体。

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balalaLy

有帮助

封闭液没有溶解好或者转膜后用到的各种buffer不干净都会出现这种情况

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