luckycan
冷泉港蛋白
一、我想总体的原则应该是:
1.抗原(免疫原)应尽可能的与检测对象的构象保持一致!
2.纯度当然越高越好了,起码要达到80%
二、对抗原的要求(根据抗体用途进行分类):
1.wb用途,我们检测的是变性的抗原。免疫原也最好是变性的,很多情况下我们拿不到足够多检测对象去做免疫原,就得考虑基因工程了,当然还涉及到表达系统的问题。最好能沟保持一致
2.IHC用途,经过多聚甲醛固定之后的抗原,介于天然与线性之间了。考虑合适片段的时候,还要关注氨基侧链的问题
3.ELISA用途,一般用天然构象的抗原去免疫,筛选拿到相关性好的抗体,也需要做大量的工作
4.流式用途,抗原的表达得用真核表达系统了,跨膜蛋白不太好表达;当然也可以选择其他类型的免疫原。
三、拿到优质抗原需要做哪些工作
1.抗原表达系统的选择
2.抗原合适的片段与结构域
3.抗原纯化工艺至关重要
4.筛选方案也很关键,决定了我们能否拿到优秀的抗体
5.样本数量是抗体优中选优的关键一环
Eason老歌迷
抗原纯度高90%以上比较好。如果不是整个蛋白的抗原,那就要求分析抗原特异结合位点。另一个是在抗体制备了需要检测效价等的时候。需要抗原有一定的分子量易于包被酶标板。
府宅
免疫预防要求:
(1)免疫原性高;(2)安全性好;
(3)有效性,能诱导机体产生保护性免疫应答
免疫治疗要求:
(1)免疫原性高;(2)安全性好
(3)有效性,能诱导机体产生的抗体具有治疗疾病的作用
(4)特异性高,抗原诱导机体产生的抗体只作用于靶器官、细胞或分子