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求助 MALDI-TOF检测BSA衍生物总是测不到信号

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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走走走走走之

我利用EDCI/NHS偶联BSA与带羧基小分子,后用纯水透析除盐,还是打不出信号,有时候是比预计分子量要小,求问大家这个后处理怎样才合适啊

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2 个回答

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Eason老歌迷

有帮助

我做过这个反应,不同物质的化学位移不同。我的化合物中NHS中两组氢的化学位移是4.02氘代氯仿做溶剂。我做的这个反应都是搅拌过夜的,反应要求无水,我用的是重蒸试剂,你换个重蒸试剂看看,再安全点可以无水无氧。确定试剂和溶剂都没问题就没问题了。

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冷泉港蛋白

有帮助

1.观察实验的过程中是否有絮状沉淀

2.可以考虑做个对照

3.样品做个蛋白电泳:欧联前,偶联后,偶联后离心的上清,偶联后离心的沉淀,透析后,透析后离心的上清,透析后离心的沉淀;同时做个BSA的对照

4.先做个蛋白电泳看看吧。

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