蛋白原核诱导表达与纯化

问题是蛋白挂柱不好。两个因素填料和蛋白

1.填料是否有问题，把镍剥离，再挂一次

2.蛋白his暴露的不好，his超级小，容易被卷进去：

A.看下his是在N端还是C端，

B.更换不同体系缓冲液

C.可以考虑两段都加个his

D.如果实在不行，换成gst标签

考虑更改蛋白纯化缓冲液或者换洗脱的beads吧，在穿流液里的话跟洗涤关系不大了

可以加大beads的量，然后洗脱，再浓缩一下

可以 提高SDS-PAGE的上样量 ，将蛋白样品超滤浓缩几倍提高浓度， WB压片时间稍微延长一点。