了不起的面包片
麻烦问一下做ip的时候flag-beads过夜,意思是能把带flag标签的蛋白拽下来是吧🤔 那相当于已经一抗敷过了吗?
我把煮完的珠子跑完电泳直接用二抗敷会有条带吗?
问题可能有点奇怪🙏但是我真的没找到该怎么做😢
冷泉港蛋白
不能这样做。
2.捕获的蛋白和抗体之间是通过非共价键结合的,煮沸可以破坏非共价键和蛋白的高级结构,破坏不了共价键。
3.因此煮沸解离后:A蛋白释放出来了 B.抗体与珠子仍旧交联在一起 C抗体没有活性了,结合不了蛋白了
综上所述,做wb必须加一抗!
Eason老歌迷
对的,是这样理解的,做ip的时候flag-beads过夜,相当于已经一抗敷过了,跑完电泳直接孵二抗即可
bamboopiggy
对,flag-beads是自带flag抗体的beads,你只要binding完了,煮了以后,要先用flag的一抗去杂,加二抗显影就可以。
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