相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)
奶油泡芙bb
2022-07-18
求助如何做低丰度蛋白,感觉做wb很困难啊,大家跑这类蛋白一般上样量和抗体稀释度什么条件呢
Eason老歌迷
我之前跑过低丰度蛋白的wb,给你两个小建议,一个是二抗浓度的把握要精准,在能呈现目的条带时降低二抗非特异性结合的概率。二是增加Tween-20的工作浓度,用更改过的工作浓度去配置TBST清洗,背景的效果可能会改善不少,自然而然目的条带也会展现出来了。
whilt-shirt
增加上样量至10-20ul,一抗稀释比例提高到1:500试试
bamboopiggy
可以加大上样量,同时提高抗体浓度,但具体怎么做还是要看预实验的结果
相关问答
问
western blot 分离胶对应的浓度与蛋白大小(KD)的关系是怎么样的呢
有没有大佬知道WB出现这种过曝光的条带是为什么啊?有什么解决办法吗?
抗体在室温放置了差不多24小时,还能用吗?
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