kyxb00
请问大家,就是之前从来没遇到过背景脏的问题,就是最近发现背景很脏,牛奶封闭2h,一抗二抗稀释都是按推荐的最大稀释比例稀释的,同样的操作,0.45um的条带就很干净,0.2um的膜只有一张看着背景不怎么脏,其他的都很脏,看不清条带,请问是为什么呀?
宁儿小贤
孔隙小的膜自然吸附的能力就会强一些,蛋白如果不太小用45的膜就行
秋秋欣欣
可能是你没封闭后,一抗可以用奶粉直接稀释抗体,洗膜的时候可以多洗几次,水换勤一些
天一湖医者
比如一抗没洗干净,或者二抗没洗干净,还有就是封闭的时候不完全
bamboopiggy
0.2um的膜,结合蛋白比0.45的多,所以如果你的蛋白分子量在20kd以上,你可以考虑全部用0.45um的膜转
Eason老歌迷
封闭液用的奶粉,现用现配。然后你孵抗体的时候可以放在大盒子里,别放小盒子
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