WB条带的背景

kyxb00

2022-06-23

请问大家，就是之前从来没遇到过背景脏的问题，就是最近发现背景很脏，牛奶封闭2h，一抗二抗稀释都是按推荐的最大稀释比例稀释的，同样的操作，0.45um的条带就很干净，0.2um的膜只有一张看着背景不怎么脏，其他的都很脏，看不清条带，请问是为什么呀？

宁儿小贤

2022-06-24

有帮助

孔隙小的膜自然吸附的能力就会强一些，蛋白如果不太小用45的膜就行

秋秋欣欣

2022-06-23

有帮助

可能是你没封闭后，一抗可以用奶粉直接稀释抗体，洗膜的时候可以多洗几次，水换勤一些

天一湖医者

2022-06-23

有帮助

比如一抗没洗干净，或者二抗没洗干净，还有就是封闭的时候不完全

bamboopiggy

2022-06-23

有帮助

0.2um的膜，结合蛋白比0.45的多，所以如果你的蛋白分子量在20kd以上，你可以考虑全部用0.45um的膜转

Eason老歌迷

2022-06-23

有帮助

封闭液用的奶粉，现用现配。然后你孵抗体的时候可以放在大盒子里，别放小盒子