【求助】如何判断 Stripping Buffer 的洗脱效果？

ryq327

2022-06-20

之前一直用的实验室的配方如下：

甘氨酸：0.94g

SDS: 5g

ddH2O: 500mL

用盐酸将 PH 调为 2

之前一直是室温洗 30min，效果很好，能洗干净。最近在做的时候，好几个抗体感觉洗不掉。我们怎么能在做实验之前就知道抗原抗体的结合能力大小呢？要不然每次做实验 stripping 不掉感觉很浪费时间。

Eason老歌迷

2022-06-20

有帮助

就我的经验来看，时间越久、次数越多、温度越高，洗脱的效果就越强。你可以通过以下方法来判断效果，先试试只洗一次，如果洗不掉，可以尝试升温和延长洗膜时间。你可以看哪个抗体条带染得最深最不好洗，你就用它开刀

bamboopiggy

2022-06-20

有帮助

这个只能根据你做wb的经验，如果这个抗体显示弱，可以先用，然后stripping掉后，再加显色深的那个抗体

balalaLy

2022-06-20

有帮助

stripping之后不敷抗体直接加显影液看看能不能出来条带