westrn blot新手，请各位帮忙看看目的条带上为啥有这么多黑点

圆梦3399

2022-06-20

细胞是肺癌H1299细胞系，目的蛋白是PDL1，一抗是CST的，稀释比例是1:500，封闭液是现配的5%牛奶-TBST

Eason老歌迷

2022-06-20

有帮助

一般不会出现这么多黑点点，你这个是封闭液的牛奶没混匀吗，取的上清液吗？或者你是不是抗体没孵均匀啊!你放摇床上摇了吗？

bamboopiggy

2022-06-20

有帮助

还是你抗体的问题，你的抗体有一些非特异的结合，你试试提高一下抗体浓度试试

balalaLy

2022-06-20

有帮助

可能是封闭的问题，现配的牛奶如果没有溶解彻底会有颗粒物质影响曝光，反复冻融的封闭液效果更好，当然要确保没有变质

天一湖医者

2022-06-20

有帮助

可能是封闭没做好，可以尝试延长封闭时间。

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