犬埃立克体virb9基因的表达

GyroGo

2022-04-25

根据genbank上犬埃立克体的全基因组序列设计virb9基因的引物，扩增片段连接18t载体测序后，将测序正确的片段连接到pet-28a，使用bl21（de3）转化后表达，IPTG作为诱导剂，改变诱导剂浓度，诱导温度，诱导时间，均不表达。

Eason老歌迷

2022-04-27

有帮助

是不是，实验中某个步骤没有做好呢？回顾检查一下。

bamboopiggy

2022-04-26

有帮助

将转化BL21DE3后的质粒也提一下，送去测序看看序列对不对，你确定放入全长了？带了start code？同期做一个阳性对照，确定你的实验步骤没问题。

天一湖医者

2022-04-26

有帮助

一般是诱导条件不适合目的蛋白的表达，可通过改变培养基，温度，诱导剂等条件重新摸索出合适的诱导条件。既然这些没问题那就考虑第二种情况，目的蛋白的菌种有问题，可通过涂板挑选单克隆菌落重新培养，或者质粒重新转化表达菌株等方法优化菌种。

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