asc寡聚化实验总是有问题😭

相关实验：蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)

ac71RN

2022-04-13

大体步骤是：正常刺激炎症小体后，加入np40裂解细胞，收集裂解液并离心。收集不溶物并清洗，用dss在37度交联，最后跑胶。有个问题，就是不溶物不能吹散，我也尝试过用针头，但是它黏黏的，会粘在针管内，无法吹下来。怎么办啊😭😭😭

1 个回答

bamboopiggy

2022-04-13

有帮助

将沉淀重悬于 50 μl CHAPS 缓冲液中，其中含有 4 mM 辛二酸二琥珀酰亚胺（溶解在 DMSO 中）。在室温下孵育 30 分钟以交联蛋白质。在 4 °C 下以 5,000 x g 离心 8 分钟，弃去上清液并将沉淀重悬于 30 μl 的 2x 蛋白上样缓冲液中。在 95°C 下加热样品 2 分钟。应该就可以