没有目的条带，背景很干净是为啥？

你是做WB吗？如果是的话，那么有可能：1.抗体失效或者特异度不够，导致无法与目的蛋白结合而催化发光；2.蛋白降解（可能是自然降解也可能是酶解），小肽段一来可能失去抗原表位，二来可能电泳时跑到胶外

1. 内参有没有，内参有说明转膜没有问题，内参没有考虑转膜是否有问题
2. 考虑抗体是否失效，有没有其他人用过这个抗体能不能出条带；是否需要延长一抗孵育时间
3. 二抗有没有失效，二抗敷对了没有
4. 自己的蛋白有没有问题

可能是一抗特异性不好，没有识别目标蛋白！

目标蛋白浓度太低，蛋白被蛋白酶水解，转膜时间短都有可能！

可能有以下原因，

1.目的细胞是否表达这种蛋白？丰度如何？
2.提取蛋白的细胞裂解液是否加入了蛋白酶抑制剂？对于磷酸化蛋白是否还加入了磷酸酶抑制剂？防止蛋白降解。
3.是否按照抗体建议的操作方法进行实验?

蛋白上样量太低或者抗体浓度过低，建议增加上样量和抗体浓度

1） 抗体加错（最常见一抗加错抗体，或二抗种属加错）。

（2） 转膜出现了问题（常见膜放反）。

（3） 发光液失效或不够灵敏。

（4） 蛋白上样量过少，一抗浓度太低。

1）抗体质量不好，换另外公司抗体试一下

2）目的蛋白不存在特异性表达，可以换几种不同细胞试一下

3）可能蛋白提取有问题，不能出条带

4)可能转膜有问题，可以用丽春红染一下

抗体未能识别出目的蛋白，故未能做出目的条带

也有可能是组分内的目的蛋白总量太少，未能达到检出限

没有目的条带，背景很干净，说明1.你转膜可能出问题了，没转过去。2.你抗体杂的位置不在这个地方。3.你抗体坏了