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蛋白样品煮沸变性有时候会导致某些膜蛋白不能被WB检测到,有没有能通用的适用于膜蛋白的变性条件,包括Buffer配方,变性温度和时间。
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蛋白一般还是要通过95-100度,煮一下来变性打开的,如果膜蛋白比较脆弱,考虑lysis里加蛋白酶抑制剂,并且将煮样时间缩短为5min
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如果是膜蛋白裂解液,不可进行高温加热操作,置于 37℃培养箱中,温浴 30 min
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可以做加完loding后不煮,上样前震一下
府宅
更适合的强的变性裂解液,如含 SB3—10、DM、ASB-14 等膜助溶剂
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置于 37℃培养箱中,温浴 30 min
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