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跑WB时,各通道上样蛋白是浓度相同还是质量相同?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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偎偎偎偎z

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6 个回答

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迟C迟

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western blot 要保证上样量一致,可以先进行浓度检测,通过浓度检测得出样品总蛋白量。根据总蛋白量调整SDS PAGE的上样体积,保证上样量一致。或者先行将SDS PAGE染色,根据条带大小调整上样体积也能保证上样量一致。

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vae1476

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质量相同,但浓度也不要差太多,否则体积差的多,条带有可能不美观

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府宅

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将蛋白浓度高的样品稀释到最低浓度的样品,这样他们的浓度就相同了,上等样体积的量就含相等的总蛋白,等体积上样

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bamboopiggy

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是蛋白总量相同,你浓度大的可以少上点,浓度小的可以多上点。

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天一湖医者

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等浓度最好,因为蛋白缓冲液的离子有带电的,等浓度的话可以保证每个槽里的蛋白受力尽可能接近相同,这样才能保证所有槽内的蛋白在同一起跑线上。如果是等质量的话,说明上样体积不一样,所含缓冲液的分子量不一样,蛋白受力就不一样。

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whilt-shirt

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初次上样是质量相同,后面根据内参调整上样量

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