包涵体沉淀（σ32)的溶解、重折叠和离子交换层析实验时

每 4 h取 150 ul 样品，用反相高效液相层析 (HPLC) 测定去垢剂含量，这样可以确定透析去除 SKL 需要多长时间和加到离子交换柱的样品中有多少去垢剂存在。

triton-100加入的量要适当，透析一般缓慢进行12-24h，觉得洗的不干净，就洗24好，着急做12h就可以。。

透析含 SKL(或许多其它去垢剂的溶液时，可遗成一缓慢的去除去垢剂的梯度，这一步非常有用，可使蛋白质有时间历经种种构象状态，从而进行正确的折叠，同时避免不希望有的疏水聚集作用。看来，如透析去除所有的 SKL，σ³² 及其他一些蛋白质将会发生聚集。因此，这里推荐的透析操作不宜完全去除 SKL，只要慢慢降至 0.01%~0.02% 即可，剩余的去垢剂可在下一步除去，届时，σ³² 结合于离子交换柱，经洗柱后再用盐溶液进行梯度洗脱。