蛋白质定量实验原理？

BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在丐界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改迚而成。

二价铜离子在碱性的条件下、可以被蛋白质还原成一价铜离子。biuret reaction。 、一价铜离子和独特的BCA Solution A、含有BCA，相互作用产生敏感的颜色反应。

两分子的BCA螯合一个铜离子。形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性、吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性兲系。因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。

考马斯亮蓝法（Bradford）、Folin-酚试剂法（Lowry）、BCA法。

Lowry法：蛋白质在碱性溶液中肽键与Cu2+鳌合，形成蛋白质-铜复合物，还原酚磷钼酸，产生蓝色化合物，蓝色深浅与蛋白质浓度呈线性关系。

Bradford法：考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合呈蓝色，在波长595nm有吸收峰，在一定的范围内与蛋白质的含量呈线性关系

BCA法基于双缩脲原理，碱性条件下蛋白质将Cu2+还原成Cu+，BCA鳌合Cu+作为显色剂，产生蓝紫色并在562nm有吸收峰，单价Cu+与蛋白质呈剂量相关性。可以根据待测蛋白在562nm处的吸光度计算待测蛋白浓度。