相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验
dxy_cbomczd5
2022-03-09
重组质粒在BL21(DE3)中通过IPTG诱导表达不出来,但是测序结果是正确的,这种情况要重新做吗?
府宅
建议可以尝试改用酵母或者昆虫细胞表达。甚至直接用哺乳细胞表达。
如果一定要用BL21表达,我的建议是尝试用较低浓度IPTG在较低温度比如室温下表达更长时间,温和的表达条件运气好的话能稍微让蛋白质没那么容易misfold,不过不要抱太大希望。如果还是表达不出来,截短蛋白到70kDa左右。专注于一部分蛋白
dxy_gwrp7ndq
大肠杆菌表达分子量超过100kDa的蛋白很难表达,蛋白质太大了原核生物很难表达,就算表达出来了也无法保证正确折叠,可能因错误折叠而聚集在insoluble fraction里。
相关产品推荐
【开学特惠】RNA pull down 技术服务| RNA Pull-down(RNA沉降)实验服务
询价
IPTG溶液,367-93-1,阿拉丁
¥133.90
克隆形成(Colony Forming)| 细胞克隆形成实验/细胞功能检测| 细胞增殖、平板克隆形成实验
细胞迁移及侵袭| MTT/CCK8/Transwell细胞迁移侵袭实验| 细胞迁移/侵袭检测/细胞功能学研究
IF免疫荧光检测| 免疫荧光染色实验| 细胞免疫荧光标记
相关问答
问
大肠杆菌摇了5小时OD600才0.4左右,这是怎么回事,想要OD600为0.6还有必要继续吗
IPTG诱导表达离心收菌后怎么保存?
IPTG诱导大肠杆菌实验中,大肠杆菌培养多久可加IPTG进行诱导?
相关方法
🔥 BCA 蛋白定量
2023-06-07
诱导蛋白表达实验中,蛋白表达是包涵体怎么办?如何调整诱导过程?
2023-06-02
IPTG 诱导蛋白表达实验
2022-02-10
推荐阅读
IPTG诱导蛋白表达的原理及方法步骤
IPTG诱导蛋白表达的原理.材料.实验方法