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为什么曝光出来目的条带总是黑黑的一团,而不是一个小条带?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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徐徐清风来

我按照文献上的步骤跑胶、转膜、孵一抗二抗,到了曝光的时候 目的蛋白的条带总是黑黑的一团,而不是一个小条带。怎么回事呢?
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5 个回答

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yysmilk

有帮助
除了考虑上述问题以外,是否考虑电泳的问题,没有进行前期高电压的浓聚,以及对比较用电泳mark,可以对比一个内标,按照标准方法进行操作,进而找出问题。
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benjimmy33108

有帮助
建议上述liona_lin的建议:降低上样量,降低一抗浓度以及调整曝光时间
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hl16010921

有帮助
1.最简单的方法是将三张胶片叠在一起,压片1分钟试试,如果最上面一张仍然太深就减少时间。 2.降低二抗浓度(国产二抗1:5000到1:10000试试)。推荐方法1.方法2可能导致出现白板。
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liona_lin

有帮助
您可以在以下几个方面进行调整:降低上样量,降低一抗浓度,或缩短曝光时间
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elite_xy

有帮助
曝光时间太长了,可以慢慢摸索曝光时间,1s,2s,5s,10s,15s,30s,45s,1min
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