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15kd 湿转半小时会不会转过头?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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想喝豆浆

RT,实验条件:0.22 的膜,转膜液含 SDS
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7 个回答

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糖guo

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如果害怕转过了,可以尝试放两张膜来转,前后两张都显影,看看结果。
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miss洁123

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我们实验室每次都每1000mL加10%SDS1ml.也没有什么不好、是不是有什么条件限制加SDS?
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想喝豆浆

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多谢以上各位,汇报一下,转膜液不加SDS,甲醇20%,湿转25分钟,15%的分离胶,出得挺好的
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roby_0_0_2000

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取决于膜的孔径,小孔径的PVDF膜
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mm8123

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能不能转过要看你用什么样的条件,是恒压转,还是恒流转,而且SDS是不利于蛋白的转移的,转膜液里不要有SDS,15kd的蛋白我做过,湿转的话,90V,60min都没问题,用0.22的PVDF膜。
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woaianla

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一般取决于膜的孔径,小孔径的PVDF膜,15kd半小时还好的,一般大小的蛋白1kd差不多1分钟的样子。
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王建勇

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我们实验室转膜液不含SDS的。SDS不利于转膜
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