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怎么用T4 RNA 连接酶链接RNA分子呢?

相关实验:用T4 RNA 连接酶连接 RNA 分子

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大蕊SB62

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1 个回答

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lzy必有我师

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(二)操作方法

1) 进行 RNA 与 RNA 分子连接的反应体系如下:

供体 (donor)RNA 100-500ng

受体 (acceptor)RNA 250ng

10XT4RNA 连接酶缓冲液 4ul

RNasin 核酸酶抑制剂 (40U/ul) 1ul

PEG,40% 20ul

T4RNA 连接酶 (9-12U/u1) 1ul

补无核酸酶的水至终体积为 4u1

2)37℃ 孵育 30 min,或 16℃ 反应过夜.

3) 纯化回收,一 20℃ 保存。

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