含双酶切位点的成熟肽段引物设计

连入质粒中的重要目的就是进行酶切和连接，当然首先就是在想要合成或者是进行 PCRT 增出靶基因的时候在核酸的两端接入酶切位点，酶切位点是与你的质粒的特点相关的 可以在质粒的图谱说明书上找取相应的位点，进行设计。

1. 成熟肽段的引物是否存在与表达载体同源的同源臂序列
2. 保护碱基的数目不同影响核酸内切酶的切割效率，这种现象是存在的，可以查一下内切酶的保护碱基表核实一下

引物设计时应该考虑到引物要有不受基因组DNA污染影响的能力，即引物应该跨外显子，最好是引物能跨外显子的接头区，这样可以更有效的不受基因组DNA污染的影响。