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为什么微流控芯片在做PCR实验室会出现阳性液滴分布不均匀的情况?如果是芯片对核酸分子的吸附作用,有什么试剂能减少吸附作用

相关实验:单分子 PCR

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dxy_5k91s8f8


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1 个回答

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loveliufudan

有帮助

微流控芯片PCR实验出现阳性液滴分布不均匀的原因可能有:

1. 芯片材料对核酸的吸附作用。一些材料表面带正电荷,会吸附带负电荷的DNA,导致液滴内核酸分布不均。

2. 核酸的表面活性剂吸附在微孔壁。造成核酸分子无法均匀释放入液滴。

3. 芯片表面处理不当,存在吸附核酸的部位。

4. 核酸样本制备不完全,存在聚集。

对策:

1. 选用耐酸、抗吸附材料,如硅硝胶芯片。

2. 在PCR反应前,用BSA或Tween 20预处理芯片,充分包覆芯片表面,防止吸附。

3. 优化芯片表面处理工艺,减少吸附部位。

4. 核酸提取要充分散解,避免聚集。

综上,优化芯片表面以及样本制备,可以有效减少核酸在芯片PCR中的吸附失活。

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