土井挞克树
菌液的pcr扩增产物最佳范围是100-250bp,过长或过短都不好。
凌晨三点Dxy
菌液pcr产物扩增的大小并不是固定的,可以根据实际需求进行选择。
一般来说,如果需要检测菌液中是否存在某种特定的基因或者片段,可以选择扩增较大的片段,比如几百到几千bp的片段。这样可以更准确地检测出目标基因或片段是否存在,并且可以提供更多的信息。
如果只需要检测菌液中是否存在某种细菌或病毒,可以选择扩增较小的片段,比如100bp左右的片段。这样可以更快地得到结果,并且可以减少扩增过程中可能出现的误差。
需要注意的是,扩增的大小也会影响扩增的效率和准确性。如果扩增的片段太大,可能会导致扩增效率降低,同时也会增加出现错误的风险。因此,在选择扩增片段大小时,需要根据实际情况进行综合考虑。
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在菌液PCR扩增中,适当调整扩增产物大小可以提高扩增效率和特异性。对于大多数常规PCR反应,通常选择目标扩增产物大小在100到1000基对之间较为合适。然而,最佳的扩增产物大小也取决于特定的目标序列和实验条件。
以下是一些一般性的考虑:
1. 长度适中:选择目标扩增产物长度适中,既不过短也不过长。过短的扩增产物可能会降低特异性,而过长的扩增产物可能会降低扩增效率。
2. 引物设计:确保引物的长度和序列选择适当,可以提高扩增效率和特异性。合适的引物设计可以帮助在目标区域产生理想大小的扩增产物。
3. 目标序列特点:考虑目标序列的特点,如序列重复性、GC含量等。一些序列特点可能会影响扩增效率和产物大小,因此需要进行适当的优化和调整。
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未处理的和处理过的菌液均可以加1-2ul作为模板,需要说明的是PCR的反应是一个微量反应,用于检测10的负3-6次方级别,如果用未做任何处理的 菌落 来做PCR其量过于大,菌落通常都是10的6次方级别