嘻嘻哈哈走人生
如题,对实验还是小白一个,由于课题需要想做PCR实验,但是没有经验,所以了解一下有做LncRNA PCR实验的实验室。
毛利小五郎的徒弟
这个可以问一下大学附属的实验室,一般都可以做。
balalaLy
可以找几篇做lncRna的文献看看,或者找硕博论文
loveliufudan
有以下几个方面需要注意:
选择合适的lncRNA数据库和引物设计软件,确保引物的特异性和敏感性。lncRNA数据库有很多,例如NONCODE、LNCipedia、LncBook等,可以根据自己的研究对象和需求选择合适的数据库。引物设计软件也有很多,例如Primer3、Primer-BLAST、Oligo等,可以根据自己的偏好和经验选择合适的软件。
选择合适的内参基因和标准曲线,确保实验的准确性和可重复性。内参基因是用来校正样品中RNA含量和PCR效率的基因,应该在不同条件下表达稳定且与目标基因无相关性。常用的内参基因有GAPDH、ACTB、18S rRNA等,可以根据自己的研究背景和文献报道选择合适的内参基因。标准曲线是用来计算目标基因相对表达量的曲线,应该具有良好的线性关系和相关系数。标准曲线可以用已知浓度的目标基因cDNA或合成的寡核苷酸片段制备,应该包括至少5个浓度梯度,并且每个浓度重复3次。
选择合适的PCR仪器和分析软件,确保实验的灵敏度和可靠性。PCR仪器是用来进行实时荧光定量PCR反应和检测荧光信号的仪器,应该具有高精度的温度控制和荧光检测功能,可以根据自己的预算和需求选择合适的仪器。分析软件是用来处理PCR数据和计算目标基因相对表达量的软件,应该具有友好的界面和强大的功能。常用的分析软件有ABI Prism、Bio-Rad CFX Manager、Roche LightCycler等,可以根据自己的习惯和经验选择合适的软件。
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