第一次要自己设计实验 想请问有没有人做过金纳米颗粒 PCR ？是否有详细的步骤能参考？
dxy_kl5kohgr
目前做的题目是用食物微生物来探讨金纳米颗粒PCR 和传统 PCR 的差别像是灵敏度。
详细问题包括
1. 能直接金纳米颗粒加到 PCR产物吗还是需要用探针
2.最后用电泳来看结果还是比色分析法
第一次自己从头到尾设计实验真的好难。看了很多文献但是都没有找出一个仔细的 protocol 想问看看有没有什么建议。谢谢！
3 个回答
loveliufudan
金纳米颗粒PCR（Gold Nanoparticle PCR）是一种利用金纳米颗粒作为PCR信号放大的探针，其灵敏度高于传统PCR。下面是一些步骤和建议，供您参考：
1.准备PCR反应体系：根据实验需要，制备PCR反应体系，通常包括PCR引物、dNTP、Taq聚合酶、MgCl2和PCR缓冲液等。可根据实验需要，将金纳米颗粒直接加入PCR反应体系中，或使用金纳米颗粒探针。
2.制备金纳米颗粒探针：金纳米颗粒探针是将PCR引物与金纳米颗粒表面修饰的探针结合，以增加PCR信号的灵敏度。可以自行合成或购买商用金纳米颗粒探针。
3.进行PCR反应：将PCR反应体系进行热循环PCR，反应程序可根据实验需要进行优化。金纳米颗粒PCR通常需要进行额外的热处理步骤，以使金纳米颗粒探针与PCR产物结合。
4.检测PCR产物：金纳米颗粒PCR产物可以使用电泳、比色法等方法进行检测。其中，电泳可以检测PCR产物的大小和数量，比色法可以通过金纳米颗粒表面等离子体共振（SPR）效应检测PCR产物。
需要注意的是，金纳米颗粒PCR对反应条件的要求较高，如金纳米颗粒探针浓度、反应时间等，需要进行优化和控制。同时，金纳米颗粒探针可能会影响PCR反应的特异性和准确性，因此需要进行对照实验，以验证实验结果的可靠性。
z流沙z
分别pcr之后进行电泳，比较条带粗细。或者设计qpcr探针引物，进行qpcr后，比较ct值
毛利小五郎的徒弟
一般金纳米颗粒加到 PCR产物是需要用探针的，后期可以用电泳看结果
dxy_kl5kohgr
谢谢！想请问是否是将金纳米颗粒探针直接加入 PCR 反应体系进行 PCR，那加的量一般来说是多少？如果 DNA template 是 2ul 的话。
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