实时荧光定量PCR为什么模板浓度高了反而CT值增大了？

可能是扩增效率低的原因，提高扩增效率

考虑可能是出现非特异扩增或引物二聚体。

样本浓度，非特异性扩增或者引物二聚体的情况，仪器、耗材、试剂都会对Ct值造成影响。

实时荧光定量PCR是一种非常灵敏的检测技术，通常可以检测非常低浓度的目标DNA分子。但是，当模板浓度过高时，可能会发生“抑制效应”，这会导致CT值的增加。

抑制效应是指，在PCR反应中出现的一种现象，即PCR反应中的某些组分抑制了反应的进行。这些抑制物质可以是PCR反应中的其他组分，也可以是模板DNA本身。当模板DNA浓度过高时，会增加PCR反应中抑制物质的浓度，导致反应的抑制效应增加。

此外，高模板浓度也可能导致PCR反应过早达到饱和，使荧光信号达到顶峰。这种情况下，进一步的PCR扩增将不会增加荧光信号，因此CT值将变大。

因此，在进行实时荧光定量PCR时，需要优化反应条件和模板浓度，以确保PCR反应的可靠性和准确性。如果遇到CT值增加的情况，可以尝试优化PCR反应条件或降低模板浓度，以消除抑制效应。