序列正中间有个polyA尾会影响PCR扩增嘛

可以分段扩增，把polyA的位置固定在尾侧

PCR扩增cDNA，长均聚物的存在导致PCR扩增不可避免地存在偏差，可能对polyA尾长和序列准确性造成影响。

序列正中间的polyA尾可能会影响PCR扩增的效果，因为在PCR反应中，polyA尾可能会导致模板DNA的断裂和扩增产物的不稳定性。

为了克服这个问题，可以考虑以下几种方法：

使用polyT引物：使用带有polyT序列的引物，可以选择性地扩增含有polyA尾的序列。在引物设计时，可以将polyT序列置于引物的3'端，以便在PCR反应中特异性地识别含有polyA尾的序列。

延长扩增时间：增加PCR反应的扩增时间，以增加扩增产物的数量和长度，从而提高扩增产物的稳定性。

使用高保真聚合酶：选择高保真度的聚合酶，可以提高PCR反应的准确性和稳定性，减少扩增产物的错误率和非特异性扩增。

优化PCR反应条件：优化PCR反应条件，如温度、时间、引物浓度和反应缓冲液等，可以提高PCR反应的效率和特异性。

需要根据具体情况和实验要求来选择合适的方法进行优化，以获得稳定和特异性的PCR扩增产物。