pcr克隆问题请教

上样量的问题，看不到目的条带可能是存在裂解。

引物设计不佳，造成了拖尾现象。2，PCR中DNA浓度加的太多，造成了拖尾。3，mg2+浓度加的太高，造成了拖尾。4，跑胶电压不合适，造成了拖尾。5，退火温度不合适，造成了拖尾。这些都可能造成拖尾，请认真分析之

胶回收回收到的目的条带浓度太低了。

因为质粒pcr用的是cDNA克隆的，扩增序列很长，所以会出现拖尾。