天一湖医者
1.
酶量过高。减少酶量;酶的质量差,调换另一来源的酶。
2.
dNTP浓度过高。减少dNTP的浓度。
3.
MgCl2浓度过高。可适当降低其用量。
4.
模板量过多。质粒DNA的用量应<50ng,而基因组DNA则应<200ng。
汤姆卜丽波
通常是非特异扩增过多引起,提高退火温度试试
PCR产物放置过久考虑产物降解;如果是PCR后及时上样,考虑引物特异性较差或者模板不纯(包括降解以及掺有别的DNA序列)
如果用PCR产物做模板的话,量太大也会有这个现象。
胶没煮好也会这样
bamboopiggy
先保证你的胶溶解的比较均匀,然后pcr完成以后,最好及时跑胶,不要放置时间太长。如果要过夜,可以在4度保存
秋秋欣欣
配的电泳液是不是用了很久?如果不是用了很久,建议PCR产物刚p完就电泳或者4度暂存。胶也现配现用。
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