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PCR条带弥散严重,怎么解决呢?

相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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dxy_7fub08l

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4 个回答

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天一湖医者

有帮助

1.

酶量过高。减少酶量;酶的质量差,调换另一来源的酶。

2.

dNTP浓度过高。减少dNTP的浓度。

3.

MgCl2浓度过高。可适当降低其用量。

4.

模板量过多。质粒DNA的用量应<50ng,而基因组DNA则应<200ng。

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汤姆卜丽波

有帮助

通常是非特异扩增过多引起,提高退火温度试试

PCR产物放置过久考虑产物降解;如果是PCR后及时上样,考虑引物特异性较差或者模板不纯(包括降解以及掺有别的DNA序列)

如果用PCR产物做模板的话,量太大也会有这个现象。

胶没煮好也会这样

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bamboopiggy

有帮助

先保证你的胶溶解的比较均匀,然后pcr完成以后,最好及时跑胶,不要放置时间太长。如果要过夜,可以在4度保存

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秋秋欣欣

有帮助

配的电泳液是不是用了很久?如果不是用了很久,建议PCR产物刚p完就电泳或者4度暂存。胶也现配现用。

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