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构敲降质粒,测序结果比对,两个酶切位点和载体序列都对上了,只有合成的敲降序列后半段不对 。是单链退火有问题还是公司合成的序列不对

相关实验:任意引物 PCR

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dxy_7fub08l

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3 个回答

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天一湖医者

有帮助

序列的方向需要验证,因为TA是随机插入到载体里面的。所以先用一个载体引物和你的insert引物配对检测得到正确方向插入的clones。

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汤姆卜丽波

有帮助

测序正反向都测了么,如果都是这个结果,那这个应该是公司合成的问题

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bamboopiggy

有帮助

大概率是公司合成的序列不对,引物做knock down的质粒,你只是把引物结合到一起,并没有进行pcr,所以如果序列出错,基本是公司合成的问题。

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