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扩增厚的产物在电泳时有时没有条带或者有的很浅怎么破啊?

相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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里哩犀浦

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3 个回答

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bamboopiggy

有帮助

可能是你的pcr程序不合适,实在不行,先做个touch down吧,然后再扩增

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汤姆卜丽波

有帮助

先看看引物是不是匹配的,然后模板浓度纯度要高一点,程序设置正确了再做一次

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天一湖医者

有帮助

这个简单,每次电泳加上阳性对照和阴性对照质控一下就行了,磁珠纯化后检测nanodrop或者qubit浓度,如果浓度大于10基本上扩增反应就没问题,电泳时marker有条带其他都没,可能是没加荧光染料,或者投入量不够,漂样,琼脂糖浓度,问题就在电泳上,或者可以用以前有条带的样本点个孔对比一下,一层一层去验证。另外如果是从基因组上单重PCR 25循环以下很可能会浓度低,建议扩大循环数到30-35看看。

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