在进行等位基因特异性 PCR实验 中,设计的引物与等位基因匹配后，电泳分析后得到的阳性产物不多是什么原因？
大丫头0824
在进行等位基因特异性 PCR实验 中,设计的引物与等位基因匹配后，电泳分析后得到的阳性产物不多是什么原因？引物浓度已经降低到一定程度了。
5 个回答
天一湖医者
有帮助
可能是pcr条件不行，还有多种原因的，比如酶，浓度，多试几次就好了
bamboopiggy
有帮助
感觉还是您的引物不特异，或者是那个点突变的不多
whilt-shirt
有帮助
可以增加引物浓度试试，如果不行就更换引物
汤姆卜丽波
有帮助
可能是退火温度，模板浓度的问题，既然有阳性产物那就做个梯度选定最合适的退火温度
Eason老歌迷
有帮助
可能是你的模板太少了，或者反应体系太大，不应该超过50ul，主要考虑试剂系统，包括Taq酶活性、引物设计、Mg离子含量、dNTP浓度。还可考虑模板DNA的提取方法，甚至你的引物是否正确稀释。
相关产品推荐
相关问答
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序