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在进行等位基因特异性 PCR实验 中,设计的引物与等位基因匹配后,电泳分析后得到的阳性产物不多是什么原因?

相关实验:等位基因特异性PCR

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大丫头0824

在进行等位基因特异性 PCR实验 中,设计的引物与等位基因匹配后,电泳分析后得到的阳性产物不多是什么原因?引物浓度已经降低到一定程度了。

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5 个回答

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天一湖医者

有帮助

可能是pcr条件不行,还有多种原因的,比如酶,浓度,多试几次就好了

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bamboopiggy

有帮助

感觉还是您的引物不特异,或者是那个点突变的不多

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whilt-shirt

有帮助

可以增加引物浓度试试,如果不行就更换引物

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汤姆卜丽波

有帮助

可能是退火温度,模板浓度的问题,既然有阳性产物那就做个梯度选定最合适的退火温度

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Eason老歌迷

有帮助

可能是你的模板太少了,或者反应体系太大,不应该超过50ul,主要考虑试剂系统,包括Taq酶活性、引物设计、Mg离子含量、dNTP浓度。还可考虑模板DNA的提取方法,甚至你的引物是否正确稀释。

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