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小鼠基因型鉴定,pcr时不仅出现目地条带还出现一条杂带,梯度pcr时仍出现,比较诡异,想问下原因

相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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甜菜112

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6 个回答

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bamboopiggy

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没事是非特异性结合,鼠尾毕竟不是dna,没那么干净

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whilt-shirt

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如果是鼠尾鉴定会出现这种情况,毕竟酸碱法提的DNA纯度不高

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Eason老歌迷

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这个没啥诡异的。这个有很多原因的,要不是你是模板不纯,或者引物特异性不高,退火温度偏低,酶的活性过高等等。

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天一湖医者

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1.引物用量偏大,引物的特异性不高。 应调换引物或降低引物的使用量。

2.循环的次数过多。 适当增加模板的量,减少循环次数。

3.酶的用量偏高或酶的质量不好。 应降低酶量或调换另一来源的酶。

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未来9

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常见的原因是:1:模板不纯,2:引物特异性不高,3:退火温度偏低。4:酶的活性过高,5:镁离子浓度不适

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汤姆卜丽波

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是你标的还是他下面的那条,那是引物二聚体,在上面那条可能是模板不纯,非特异性条带

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